ames试验名词解释环境生物学Ames试验中微生物学关键名词释义ames试验的基

mes试验（AmesTest），全称细菌回复突变试验（BacterialReverseMutationAssay），是一种利用微生物（主要是营养缺陷型细菌）检测化学物质致突变性的经典遗传毒性试验。下面内容从多个角度解析该试验的核心概念：

1.基本定义与原理

微生物基础：

用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌（Salmonellatyphimurium）或色氨酸营养缺陷型大肠杆菌（Escherichiacoli）菌株。这些菌株因基因突变失去合成特定氨基酸（如组氨酸/色氨酸）的能力，只能在含该氨基酸的培养基中生长。

回复突变机制：

受试物具有致突变性，可诱导菌株基因发生回复突变（ReverseMutation），使其恢复合成氨基酸的能力，从而在缺乏相应氨基酸的培养基上生长并形成肉眼可见的菌落。通过计数菌落数量，评估受试物的致突变潜力。

验需组合多种菌株，以覆盖不同类型的基因突变：

碱基置换型突变检测菌株：

TA100、TA1535（鼠伤寒沙门氏菌）

WP2uvrA（大肠杆菌）

于检测DNA碱基对的替换（如G-C→A-T）。

移码突变检测菌株：

TA98、TA97/TA97a、TA1537（鼠伤寒沙门氏菌）

于检测DNA序列中碱基的插入或缺失。

广谱响应菌株：

TA102（含质粒pKM101）：增强对氧化损伤和交联剂的敏感性。

菌株特性：所有菌株均携带附加突变（如脂多糖屏障缺陷、DNA修复缺陷），以提升检测敏感性。

代谢活化体系（S9混合液）：

模拟哺乳动物代谢环境，试验需加入大鼠肝脏微粒体酶（S9）与辅酶（NADP、G-6-P）的混合液，以活化需代谢转化才具致突变性的物质。

试验技巧：

平板掺入法（主流技巧）：将菌液、受试物、S9混合液（或缓冲液）与顶层琼脂混合，倾注于底层培养基上培养48小时。

点试法/预培养法：适用于快速初筛。

结局判定：

阳性：回复突变菌落数≥阴性对照的2倍（TA1535需≥3倍），且呈剂量依赖性增长。

阴性：菌落数与对照无显著差异。

快速筛选致癌物：

致突变性与致癌性高度相关，Ames试验被广泛用于食品添加剂、化妆品、药品、工业化学品等的遗传毒性评估。

优势：

本低、周期短（48-72小时）、敏感性高，可检测多种突变类型。

局限性：

在假阳性/假阴性，需结合其他遗传毒性试验综合判断。

国际指南：

循OECD471、ISO10993-3等标准，要求至少5种菌株组合、5个浓度梯度、重复试验确保重现性。

mes试验通过微生物的基因回复突变现象，为化学物质的潜在遗传毒性提供了高效、可靠的初筛工具，是现代毒理学和安全性评价的基石其中一个。